현장 하이브리드 화

그만큼 현장 하이브리드 화 염색체 이상을 감지하는 방법입니다. 특정 염색체는 형광 염료로 표시되고 DNA 프로브에 결합됩니다. 이 기술은 유전자 돌연변이의 산전 진단에 사용됩니다.

현장 하이브리드 화란 무엇입니까?

in situ hybridization 또는 형광 현장 하이브리드 화 RNA 또는 DNA의 핵산은 분자 유전 적 방법을 사용하여 특정 조직이나 세포에서 검출됩니다. 일반적으로 이러한 유형의 진단은 임신 중 구조적 또는 수치 적 염색체 이상을 감지하는 데 사용됩니다.

이를 위해 인위적으로 제조 된 프로브가 사용되며 자체적으로 핵산으로 구성됩니다. 그런 다음 염기 쌍을 통해 유기체의 핵산에 결합합니다. 이 결합은 혼성화라는 용어를 의미합니다. 증거는 환자의 생활 구조를 기반으로하므로 현장 증거와 일치합니다. 이는 시험관에서 검출이 이루어지는 시험관 내 방법과 구별됩니다. 이 방법은 과학자 인 Joe Gall과 Mary Lou Pardue가 20 세기에 개발했습니다.

기술은 그 이후로 발전했습니다. 예를 들어 그 당시에는 방사능 프로브가 사용되었지만 오늘날에는 마커 분자에 공유 결합이있는 형광 표지 프로브가 사용됩니다.

기능, 효과 및 목표

In-situ 혼성화는 일반적으로 염색체 이상, 즉 karyogram에서 감지 할 수없는 염색체 이상을 감지하는 데 사용됩니다. 이것은 임신 중에 유전성 질병이 결정될 때 항상 방법이 사용된다는 것을 의미합니다.

염색체 이상은 오늘날 과소 평가되어서는 안되는 문제이기 때문에 시간이 지남에 따라 방법의 사용이 증가했습니다. 혼성화는 산모의 양수에서 나온 천연 세포를 사용하여 발생합니다. 이 기술의 기본은 색 표시 프로브를 DNA 부분에 결합하는 것입니다. 바인딩 덕분에 개별 사본이 광 신호를 방출하여 현미경으로 볼 수 있기 때문에 나중에 현미경으로 사본 수를 평가할 수 있습니다. 다른 절차가 있습니다. 분석은 바인딩 직후에 수행됩니다.

이 경우 비오틴과 같은 형광 염료가 사용되어 DNA 프로브에 직접 결합됩니다. in-situ 혼성화의 간접 방법을 사용하면 형광 물질이 혼성화 후에 만 ​​프로브에 결합 할 수 있기 때문에 혼성화 직후에 평가를 수행 할 수 없습니다. 이 간접 방법은 더 민감하다고 여겨지기 때문에 직접 방법보다 더 자주 사용됩니다. 염색체 특이 적 centrometer DNA 프로브 외에도 유전자좌 특이 적 DNA 프로브, 염색체 특이 적 DNA 라이브러리 프로브 및 비교 게놈 혼성화도 있습니다.

염색체 특정 centrometer DNA 프로브는 염색체 수치 이상을 감지하는 데 사용할 수 있습니다. 이는 염색체가 중복되거나 삭제 된 것이 의심 될 때 주로 사용된다는 것을 의미합니다. 위치 특이 적 DNA 프로브는 karyogram에서 검출 할 수없는 최소한의 돌연변이 검출에 특히 적합합니다. 염색체 특이 적 DNA 라이브러리 프로브는 특히 삽입 및 전좌를 감지하는 데 사용됩니다.

반면에 비교 게놈 혼성화는 염색체 물질의 손실과 이득에 대한 포괄적 인 분석입니다. 오늘날, in-situ 혼성화는 다양한 염색체 돌연변이의 진단에 매우 중요합니다.예를 들어 다운 증후군의 진단에서 탐침은 21 번 염색체에 결합하는데,이를 위해 일반적으로 염색체 특이 적 탐침이 사용되며이 질환이 의심되는 경우 사용할 수 있습니다.

예를 들어, 부모가 이전에 질병에 걸린 아이를 출산 한 적이 있고 초음파 영상이 비정상 인 경우 의심이 생길 수 있습니다. 이중 결합 대신 삼중이 존재하여 삼중 색 신호가 출력되면 진단이 확정 된 것으로 간주합니다.

위험, 부작용 및 위험

예를 들어 PCR과 달리 in-situ 혼성화는 오염에 훨씬 덜 민감합니다. 또한 프로세스에 필요한 시간이 상당히 적습니다. 그러나 배아는 특히 염색체 패턴을 형성하기 때문에 나머지 염색체 분포와 다른 세포의 유전 적 상태는 주어진 패턴에서 추론 할 수 없습니다.

색상 신호는 다른 이유로 인해 겹치거나 보이지 않을 수도 있습니다. 결과적으로 임신 중 진단 도구로서의 현장 교잡은 상대적으로 오류가 발생하기 쉽습니다. 오진이 발생할 수 있으며 부모는 건강한 배아에 대해 결정할 수 있습니다. in situ hybridization 오류에 대한 감수성을 줄이기 위해 적어도 두 개의 배아 세포를 동시에 검사해야합니다. 두 개의 세포를 병렬로 검사하면 오진의 위험은 무시할 수 있습니다.

그러한 경우 부모는 진단에 절대적으로 의존 할 수 있습니다. 현장 교잡은 모든 임산부에게 제공되는 것이 아니라 위험 그룹의 여성에게만 제공됩니다. 그럼에도 불구하고 임산부는 자신의 요청에 따라 이러한 유형의 진단을 거부하지 않습니다. 비정상적인 초음파 소견이나 비정상적인 혈청은 의사가 진단 절차를 제공하도록 유도 할 수 있습니다. 대부분이 아니지만 염색체 이상은 in situ hybridization을 사용하여 진단 할 수 있습니다.

따라서 in situ hybridization은 단독으로 수행해서는 안되며 항상 기존의 염색체 검사와 함께 사용해야합니다. 임산부의 보살핌은이 절차에서 중요한 역할을합니다. 분석 전에 임산부와 진단 방법에 대해 잘 근거한 토론이 있으며, 이는 기술의 위험, 가능성 및 한계를 설명합니다.